使用(yong) Arium超純水(shui)系(xi)統 最(zui)大限度地減(jian)少 LCMS幹(gan)擾
LC-MS輕松(song)拿(na)捏,實驗(yan)“水(shui)到(dao)渠(qu)成"
在(zai)生(sheng)物制藥領(ling)域(yu),尤其(qi)是在研發和(he)生(sheng)產(chan)上(shang)遊(you)階(jie)段(duan),精確(que)和(he)可靠(kao)性(xing)是實驗(yan)成功(gong)的(de)關(guan)鍵。從(cong)細(xi)胞培(pei)養到(dao)抗(kang)體藥物的生(sheng)產(chan),每(mei)壹個步(bu)驟(zhou)都對(dui)實(shi)驗(yan)條件有(you)Ji高的要求。在(zai)這些(xie)過(guo)程中,實驗(yan)用(yong)水(shui)的(de)純凈(jing)度(du)尤其(qi)重要(yao),因為(wei)它直(zhi)接影(ying)響到(dao)實(shi)驗(yan)的結(jie)果。
在生物制藥的(de)上遊(you)實(shi)驗(yan)室中,通(tong)常會(hui)進行多(duo)種關(guan)鍵實(shi)驗(yan),比如(ru)細(xi)胞培(pei)養、分子生物學實(shi)驗(yan)和(he)蛋(dan)白(bai)質(zhi)純化(hua)和(he)分(fen)析(xi),這些(xie)實(shi)驗(yan)對純水(shui)都有(you)不(bu)同(tong)程(cheng)度(du)的要求,水(shui)中(zhong)的(de)任何(he)雜(za)質(zhi),如(ru)有(you)機物、DNA酶、離(li)子(zi)等(deng)都可能(neng)對實(shi)驗(yan)結果產(chan)生(sheng)負面影(ying)響:
細(xi)胞培(pei)養
水(shui)中(zhong)的(de)有(you)機汙(wu)染物可以(yi)作為(wei)外源(yuan)性(xing)生長(chang)因子(zi)或抑制劑,影(ying)響(xiang)細(xi)胞的(de)代(dai)謝和(he)生(sheng)長(chang)動(dong)態
分子(zi)生(sheng)物實驗(yan)
微(wei)量(liang)的DNA或RNA汙(wu)染可以(yi)引(yin)起(qi)PCR實驗(yan)中的(de)非特異性(xing)擴增(zeng),從(cong)而影響實驗(yan)結果的準(zhun)確(que)性(xing)和(he)重(zhong)復(fu)性(xing)
蛋白(bai)質(zhi)純化(hua)和(he)分(fen)析(xi)
水(shui)中(zhong)汙(wu)染離(li)子(zi)可以(yi)與(yu)蛋(dan)白(bai)質(zhi)相(xiang)互(hu)作用(yong),改(gai)變(bian)其(qi)電荷狀(zhuang)態,影響(xiang)蛋(dan)白(bai)質(zhi)的(de)分離和(he)鑒(jian)定(ding)

分析設(she)備(bei)對(dui)實(shi)驗(yan)室水(shui)質(zhi)有(you)較高要求
液相(xiang)色譜-質(zhi)譜(pu)聯用(yong)技(ji)術(shu)(LC-MS)是生物制藥實(shi)驗(yan)室中常(chang)用(yong)的(de)分(fen)析設備(bei),其(qi)實驗(yan)中對(dui)水(shui)質(zhi)的(de)要求尤(you)其(qi)嚴格(ge)。低質(zhi)量(liang)的水(shui)可能(neng)引入背景噪音(yin),幹(gan)擾色(se)譜和(he)質(zhi)譜(pu)的讀(du)數,影響(xiang)數據的(de)準(zhun)確(que)性(xing)和(he)重(zhong)復(fu)性(xing)。
有(you)機化(hua)合(he)物的影(ying)響(xiang)
靈(ling)敏(min)度降低(di):有(you)機化(hua)合(he)物與(yu)分(fen)析(xi)物競爭(zheng)固(gu)定(ding)相(xiang)的活性(xing)位點,降低(di)分析(xi)物的保(bao)留(liu)量(liang),降低(di)方法的(de)靈(ling)敏(min)度
假(jia)峰(feng)和(he)分(fen)離(li)幹(gan)擾:有(you)機化(hua)合(he)物的堆(dui)積可導致假峰(feng)的(de)產(chan)生(sheng),幹(gan)擾色(se)譜分(fen)離過(guo)程
影響分(fen)析準(zhun)確(que)度:汙(wu)染物長(chang)期(qi)積聚(ju)形(xing)成新(xin)的(de)固定(ding)相(xiang),導致峰(feng)拖(tuo)尾和(he)保(bao)留(liu)時(shi)間(jian)的變(bian)化(hua)
細(xi)菌(jun)和(he)生(sheng)物膜(mo)汙(wu)染
色(se)譜(pu)柱(zhu)易(yi)堵塞:由細(xi)菌(jun)和(he)生(sheng)物膜(mo)殘留(liu)物引起(qi),影響(xiang)流動(dong)相(xiang)的流動(dong)性(xing)和(he)色(se)譜(pu)性(xing)能(neng)
結果受幹(gan)擾:細(xi)菌(jun)產(chan)生(sheng)的(de)有(you)機副(fu)產(chan)物如(ru)熱(re)原(yuan)和(he)酶(mei)類(lei),可導致色譜(pu)結(jie)果的幹(gan)擾
無(wu)機汙(wu)染的(de)影(ying)響(xiang)
背景噪音(yin)增加(jia):例如(ru)堿離(li)子的(de)過(guo)量存在可能(neng)改變(bian)分(fen)析結果,增加(jia)背(bei)景噪音(yin)
影響(xiang)分離度(du):水(shui)中(zhong)的(de)離(li)子(zi)汙(wu)染物可能(neng)改變(bian)溶(rong)液的離(li)子(zi)強度,進而影響色譜(pu)分(fen)離(li)的特性(xing),包(bao)括電導率(lv)和(he)溶(rong)液的化(hua)學物理性(xing)質(zhi)
在(zai)本(ben)次應(ying)用(yong)案(an)例中,使用(yong)賽(sai)多(duo)利(li)斯(si)Arium® Mini UV超純水(shui)系(xi)統處(chu)理的水(shui)在(zai)LCMS分(fen)析(xi)中(zhong)表(biao)現(xian)出(chu)色(se)。與(yu)市(shi)售的瓶裝LCMS級水(shui)和(he)設(she)施(shi)中(zhong)的(de)去離(li)子(zi)水(shui)相(xiang)比,Arium® 水(shui)能(neng)顯(xian)著(zhu)降低(di)背景水(shui)平,提高分析靈(ling)敏(min)度,結(jie)果更為精確(que)和(he)壹致。


實驗(yan)結果
壹
提供(gong)高質(zhi)量(liang)的色譜分(fen)析(xi)用(yong)水(shui)

圖1:總(zong)離(li)子色(se)譜圖(TIC;1;TOF MS(400-7,000),95 V ESI+),質(zhi)譜(pu)數據(2;平均時(shi)間(jian)2.1751 min,TOF MS(400-7,000),95 V ESI+:組合(he))來(lai)自(zi)單克(ke)隆(long)抗體樣品和(he)紫(zi)外(wai)線痕(hen)跡(3;通(tong)道(dao)名(ming)稱:TUV 280)
所用(yong)系(xi)統為(wei):配(pei)備(bei)有(you)BioResolve™RP mAb Polyphenyl色譜(pu)柱(zhu)的(de)Waters BioAccord™ LCMS
在實驗(yan)中,比(bi)較了全(quan)新(xin)打開的(de)LCMS級瓶裝水(shui)、Arium® 水(shui)和(he)內(nei)部(bu)設(she)施(shi)去離(li)子(zi)(DI)水(shui)的(de)性(xing)能(neng)。LCMS級和(he)Arium® 水(shui)表(biao)現(xian)出(chu)了類似(si)的(de)高質(zhi)量(liang)色譜圖,證明它們適(shi)合(he)進行精確(que)的LCMS分(fen)析。相(xiang)比之下,去離(li)子(zi)水(shui)的(de)色(se)譜(pu)圖顯(xian)示出(chu)較(jiao)高的背景水(shui)平和(he)微(wei)小的(de)峰(feng)面積差(cha)異,暗(an)示該水(shui)源(yuan)可能(neng)含有(you)雜質(zhi)如(ru)總(zong)有(you)機碳(tan)(TOC)、無機物和(he)細(xi)菌(jun),這可能(neng)影響(xiang)分析(xi)的準(zhun)確(que)性(xing)和(he)可靠(kao)性(xing)。
考(kao)慮(lv)到(dao)LCMS級瓶裝水(shui)壹旦瓶(ping)裝水(shui)被(bei)打開,其(qi)水(shui)質(zhi)可能(neng)會因多(duo)種因素而下降,這需要在(zai)實驗(yan)設計(ji)和(he)操作中(zhong)特別考(kao)慮(lv),同時成本(ben)也是考(kao)量的(de)壹大因素。
二(er)
Arium® 純水(shui)讓(rang)上遊(you)實(shi)驗(yan)中的(de)樣本(ben)分析(xi)結果更清(qing)晰

圖2:總(zong)離(li)子色(se)譜圖(TIC;1,TOF MS(400–7,000),95 V ESI+)和(he)用(yong)Arium®-水(shui)制備(bei)的(de)單克(ke)隆(long)抗體樣品的(de)質(zhi)譜(pu)圖(平均時(shi)間(jian)2.1418分鐘(zhong)(UV3)和(he)2.1668分(fen)鐘(zhong)(PERF),2,TOF MS(400–7,000),95 V ESI+:組(zu)合(he))。
賽(sai)多(duo)利(li)斯(si)Arium® 實驗(yan)室純水(shui)的(de)具備(bei)*性(xing)能(neng)和(he)可靠(kao)性(xing),已(yi)被(bei)廣泛應用(yong)於(yu)上(shang)遊(you)實(shi)驗(yan)室的LCMS應(ying)用(yong)中(zhong)。圖2展示了從生(sheng)物反(fan)應(ying)器內(nei)和(he)灌註(zhu)液路線(PERF)采集的(de)CHO細(xi)胞培(pei)養物樣本(ben)的完(wan)整(zheng)質(zhi)量(liang)分析結果。可以(yi)清(qing)楚(chu)地觀察到(dao)兩個樣本(ben)中糖(tang)型豐度(du)的(de)微(wei)小差(cha)異,以(yi)及(ji)較(jiao)低的背景噪音(yin),這些(xie)特點(dian)使得(de)分析(xi)結果更加(jia)清(qing)晰和(he)容(rong)易(yi)解(jie)讀(du)。

結論(lun)
在(zai)追(zhui)求高質(zhi)量(liang)生物制藥研究(jiu)和(he)生(sheng)產(chan)過(guo)程中,選(xuan)擇合(he)適(shi)的(de)實驗(yan)材(cai)料(liao)和(he)條件是成功(gong)的(de)關(guan)鍵。Arium® 系(xi)列(lie)超純水(shui)系(xi)統提供(gong)的(de)高標(biao)準(zhun)純水(shui),為(wei)生(sheng)物制藥上(shang)遊(you)的(de)各種實驗(yan)提供(gong)了強有(you)力的(de)支持,可以(yi)獲(huo)得(de)更優的色(se)譜性(xing)能(neng),同時(shi)提高了實驗(yan)的準(zhun)確(que)性(xing)和(he)效(xiao)率(lv)。
選(xuan)擇高質(zhi)量(liang)的純水(shui)系(xi)統,是確(que)保生(sheng)物制藥研發精準(zhun)高效(xiao)的(de)明智選(xuan)擇。



