離子(zi)色(se)譜(pu)--在(zai)高效液(ye)相色(se)譜(pu)的(de)觸(chu)角(jiao)之(zhi)外(wai)
| 離子色(se)譜(pu)--在(zai)高效液(ye)相色(se)譜(pu)的(de)觸(chu)角(jiao)之(zhi)外(wai) | |
| 高效(xiao)液相色(se)譜(pu)(HPLC)和離子(zi)色(se)譜(pu)(IC)都(dou)是(shi)制藥(yao)、食(shi)品和環境(jing)等(deng)領(ling)域分析(xi)實驗室的(de)常用(yong)設(she)備(bei),尤其是(shi)HPLC,在(zai)壹家單(dan)位中(zhong)有(you)幾十(shi)乃(nai)至幾百(bai)臺HPLC同時運轉(zhuan)的(de)情(qing)形並不(bu)少見(jian),IC的(de)數(shu)量(liang)雖然(ran)比(bi)HPLC少壹些,但(dan)是(shi)也經常可(ke)以見(jian)到(dao),那(na)麽二者究(jiu)竟有(you)什麽異(yi)同呢?下(xia)面(mian)我(wo)們壹起來看(kan)壹下(xia)吧(ba)! 1、什(shen)麽是(shi)液(ye)相色(se)譜(pu)? 液(ye)相色(se)譜(pu)是(shi)指(zhi)對樣品中(zhong)的(de)化(hua)合物進(jin)行分離(li)並定量的(de)壹類物理(li)化(hua)學技(ji)術,通常由(you)攜(xie)帶樣品的(de)流動相和對樣品中(zhong)化(hua)合物起到(dao)分離(li)作(zuo)用(yong)的(de)固定相組(zu)成。現代(dai)液(ye)相色(se)譜(pu)的(de)固定相通常為(wei)粒(li)徑(jing)在(zai)μm範圍的(de)小顆粒(li),並填(tian)充到(dao)空(kong)心柱中(zhong),以分離(li)柱的(de)形式呈(cheng)現(xian)。 樣品中(zhong)化(hua)合物的(de)分離(li)取(qu)決於各(ge)組(zu)分與(yu)固定相結(jie)合能力的(de)強(qiang)弱,與(yu)固定相結(jie)合較(jiao)強(qiang)的(de),在(zai)分離(li)柱中(zhong)有(you)更好(hao)的(de)保(bao)留,不(bu)容易被流動相沖(chong)出(chu),而與(yu)固定相結(jie)合較(jiao)弱的(de)組(zu)分,則(ze)在(zai)固定相中(zhong)保(bao)留較(jiao)差(cha),流動相稍稍沖(chong)洗(xi)即(ji)可(ke)流出(chu),這樣利用(yong)待(dai)分離(li)組(zu)分與(yu)固定相結(jie)合能力的(de)強(qiang)弱,便(bian)可(ke)達到(dao)對樣品中(zhong)化(hua)合物進(jin)行分離(li)的(de)目(mu)的(de),然(ran)後使用(yong)不(bu)同的(de)檢(jian)測(ce)技術(shu)便(bian)可(ke)對不(bu)同的(de)化(hua)合物定量。 離(li)子(zi)色(se)譜(pu)(IC)和高效(xiao)液(ye)相色(se)譜(pu)(HPLC)是(shi)經常用(yong)的(de)兩(liang)種液相色(se)譜(pu)技(ji)術(shu)。對於各(ge)個(ge)行業(ye)來說(shuo),從原材(cai)料(liao)檢驗到(dao)添加(jia)劑(ji)分析(xi),再(zai)到(dao)終產品的(de)質(zhi)量(liang)控(kong)制(zhi),它(ta)們都(dou)是*的(de)工(gong)具。
2、HPLC和IC的(de)不(bu)同之(zhi)處(chu) 分離(li)機(ji)理(li)不(bu)同 在(zai)HPLC中(zhong),待(dai)測(ce)物質(zhi)的(de)分離(li)是(shi)基(ji)於該物質與固定相的(de)親(qin)水(shui)相互作用(yong)(正相HPLC)或(huo)疏水(shui)相互作用(yong)(反相HPLC),因(yin)此(ci)HPLC適(shi)用(yong)於極(ji)性(xing)和非(fei)極(ji)性(xing)有(you)機化(hua)合物的(de)分離(li)。 其中(zhong)反相HPLC的(de)應(ying)用(yong)較(jiao)為(wei)普遍,壹般使用(yong)有(you)機溶(rong)劑(ji)作(zuo)為(wei)流動相。在(zai)IC中(zhong)經常用(yong)的(de)分離(li)機(ji)制(zhi)是離子交(jiao)換,根據(ju)待(dai)測(ce)物的(de)不(bu)同,還(hai)可(ke)以使用(yong)離子(zi)排斥(chi)和離子(zi)對兩(liang)種分離(li)機(ji)理(li)進(jin)行分離(li)。在(zai)使用(yong)離子(zi)交換機理(li)進(jin)行分離(li)時,待(dai)測(ce)離子(zi)與固定相表(biao)面(mian)的(de)離(li)子(zi)交(jiao)換基團(tuan)發生交(jiao)換,屬於化(hua)學反應,而不(bu)像HPLC,分離(li)僅(jin)僅(jin)依(yi)靠(kao)物理(li)吸(xi)附作用(yong)。而且(qie),當離(li)子色(se)譜(pu)選(xuan)擇(ze)合適的(de)色(se)譜(pu)柱時,也可(ke)以分離(li)非(fei)離子化合物和極(ji)性(xing)化(hua)合物。
流動相不(bu)同 HPLC的(de)分離(li)是(shi)使用(yong)有(you)機溶(rong)劑(ji)作(zuo)為(wei)流動相進(jin)行的(de),通常使用(yong)梯度(du)洗(xi)脫來(lai)獲(huo)得弱保(bao)留分析(xi)物(wu)的(de)良好(hao)分離(li)度(du)並加(jia)快強保(bao)留分析(xi)物(wu)的(de)洗(xi)脫。為(wei)了(le)與洗脫液(ye)混(hun)溶(rong),通常也(ye)將樣品溶(rong)解(jie)在(zai)有(you)機溶(rong)劑(ji)中(zhong)。與(yu)HPLC相反,離子(zi)色(se)譜(pu)法中(zhong)的(de)分離(li)在(zai)水(shui)相中(zhong)進(jin)行,典型的(de)流動相壹般由(you)超(chao)純(chun)水(shui)和溶(rong)解(jie)的(de)鹽或(huo)酸組(zu)成。絕大(da)多(duo)數(shu)IC分離(li)可(ke)通過等(deng)度(du)洗(xi)脫進(jin)行,僅有(you)少數(shu)分離(li)需(xu)要梯(ti)度(du)洗(xi)脫。
分離(li)柱不(bu)同 IC和HPLC中(zhong)的(de)分離(li)柱均(jun)采用(yong)基於表(biao)面(mian)改(gai)性(xing)的(de)顆(ke)粒(li)作(zuo)為(wei)固定相,待(dai)分離(li)的(de)分析(xi)物(wu)與(yu)固定相發生相互作用(yong),實現分離(li)。 但(dan)是(shi)二者固定相的(de)表(biao)面(mian)官(guan)能(neng)化(hua)有(you)所(suo)不(bu)同:IC中(zhong)的(de)固定相以陰(yin)離子或(huo)陽離子(zi)交(jiao)換基團(tuan)為(wei)特(te)征(zheng),而HPLC則(ze)依(yi)賴於非(fei)極(ji)性(xing)(反相HPLC)或(huo)極(ji)性(xing)(正(zheng)相HPLC)官(guan)能團。此(ci)外(wai)IC與HPLC的(de)分離(li)柱所(suo)使用(yong)的(de)外(wai)殼也(ye)有(you)所(suo)不(bu)同,HPLC分離(li)柱壹般使用(yong)不(bu)銹鋼(gang)外(wai)殼,而由(you)於IC的(de)流動相容(rong)易與不(bu)銹鋼(gang)發生腐(fu)蝕(shi)反應,所(suo)以IC分離(li)柱壹般采用(yong)惰性(xing)的(de)PEEK外(wai)殼。
檢(jian)測(ce)器(qi)不(bu)同 HPLC中(zhong)使用(yong)的(de)主(zhu)要檢(jian)測(ce)器(qi)是(shi)UV檢測(ce)器(qi)。UV檢(jian)測(ce)器(qi)能(neng)夠(gou)檢測(ce)具有(you)紫外(wai)光(guang)吸(xi)收的(de)物(wu)質(zhi):從(cong)分離(li)柱流出(chu)的(de)流動相會(hui)受到(dao)紫外(wai)線(xian)的(de)照(zhao)射,根據(ju)在(zai)不(bu)含(han)樣品的(de)流動相和含(han)有(you)樣品的(de)流動相之(zhi)間測(ce)得的(de)吸(xi)光(guang)度(du)差(cha)異(yi),便(bian)可(ke)以對分析(xi)物(wu)進(jin)行定量。而IC則(ze)主(zhu)要采用(yong)電導(dao)檢測(ce)器(qi),通過測(ce)量流動相電導(dao)率(lv)的(de)變(bian)化(hua)來(lai)檢(jian)測(ce)和定量分析(xi)物(wu),靈(ling)敏度(du)較(jiao)高(gao)。
抑制器(qi) 離(li)子色(se)譜(pu)中(zhong)樣品的(de)分離(li)需(xu)要使用(yong)可(ke)以導(dao)電的(de)鹽或(huo)酸流動相,這樣造(zao)成電導(dao)檢測(ce)器(qi)檢(jian)測(ce)到(dao)的(de)信(xin)號(hao)背景(jing)值(zhi)很(hen)高(gao),嚴(yan)重(zhong)降低檢測(ce)靈(ling)敏度(du),此(ci)時需要使用(yong)抑制(zhi)器(qi)來(lai)抑制背景(jing)信(xin)號(hao)值(zhi),增加(jia)檢(jian)測(ce)靈(ling)敏度(du),而HPLC則(ze)不(bu)存在(zai)這個問題,因(yin)此(ci)也(ye)不(bu)需要抑(yi)制器(qi)。
3、IC是(shi)HPLC的(de)有(you)力補充 離(li)子色(se)譜(pu)法在(zai)水(shui)、食(shi)品和藥(yao)品的(de)分析(xi)中(zhong)都(dou)具有(you)廣泛的(de)應(ying)用(yong),典型樣品的(de)範(fan)圍(wei)從(cong)超(chao)純(chun)水(shui)和飲用(yong)水(shui)到(dao)嚴重(zhong)汙(wu)染的(de)廢水(shui),從(cong)環境(jing)樣品到(dao)食(shi)品和飲料樣品,IC可(ke)以分析(xi)其中(zhong)從(cong)萬億分之(zhi)幾(ji)到(dao)百(bai)分之(zhi)幾(ji)濃度(du)的(de)物(wu)質(zhi),其中(zhong)極(ji)性(xing)物(wu)質(zhi)尤(you)其是(shi)陰(yin)陽離子的(de)分析(xi),IC具有(you)*的(de)優(you)勢(shi),是(shi)HPLC強(qiang)有(you)力的(de)補充。
藥(yao)物(wu)分析(xi) 左乙拉西(xi)坦(tan)藥(yao)物(wu)是(shi)壹種用(yong)於治療(liao)癲(dian)癇病的(de)藥(yao)物(wu),氯化(hua)物(wu)和溴化(hua)物(wu)是(shi)其中(zhong)的(de)雜(za)質(zhi), HPLC無法分離(li)這些陰(yin)離子雜質,但(dan)氯離(li)子(zi)和溴離(li)子(zi)在(zai)IC色(se)譜(pu)柱上(shang)可(ke)以很(hen)好(hao)的(de)分離(li)並通過抑(yi)制(zhi)電導(dao)檢測(ce)從而達到(dao)高靈(ling)敏度(du)和高精(jing)度(du)的(de)測(ce)定。
左乙拉西(xi)坦(tan)中(zhong)氯離(li)子(zi)和溴離(li)子(zi)的(de)測(ce)定 水(shui)質(zhi)分析(xi) 近(jin)些年來環境(jing)問(wen)題越來越受到(dao)大(da)家的(de)關註,其中(zhong)水(shui)質(zhi)是(shi)環境(jing)領(ling)域中(zhong)十(shi)分重(zhong)要的(de)內(nei)容(rong),生態(tai)環境(jing)部(bu)僅(jin)近(jin)幾年發布(bu)的(de)壹系列標準中(zhong)有(you)多項(xiang)涉(she)及到(dao)水(shui)中(zhong)離(li)子(zi)類物質的(de)檢(jian)測(ce),這些都(dou)是(shi)HPLC無法涉(she)及的(de)領(ling)域,卻是IC擅長的(de)。
HJ 84-2016水(shui)質(zhi) 無機(ji)陰(yin)離子(F-、Cl-、NO2-、Br-、NO3-、PO43-、SO32-、SO42-)的(de)測(ce)定 離子(zi)色(se)譜(pu)法 食(shi)品分析(xi) 除(chu)了(le)離(li)子類物質的(de)檢(jian)測(ce)之外(wai),IC使用(yong)安培檢測(ce)器(qi)進(jin)行糖類物(wu)質(zhi)的(de)檢(jian)測(ce),也具有(you)靈(ling)敏度(du)高(gao)、操(cao)作簡(jian)便(bian)等(deng)HPLC*的(de)優(you)勢(shi),因(yin)此(ci)近(jin)使用(yong)IC檢測(ce)食(shi)品中(zhong)的(de)糖類的(de)國(guo)家標準也(ye)陸續(xu)發布(bu)。
GB5009.255—2016食(shi)品安全國(guo)家標準 食(shi)品中(zhong)果聚糖的(de)測(ce)定
除以上(shang)內容(rong)外(wai),離子(zi)色(se)譜(pu)近(jin)幾年在(zai)藥(yao)品氨基(ji)糖苷類(lei)抗生素(su)的(de)檢(jian)測(ce)、水(shui)中(zhong)消(xiao)毒(du)副(fu)產物(wu)的(de)檢(jian)測(ce)、食(shi)品中(zhong)糖類和部分維(wei)生素(su)的(de)檢(jian)測(ce)等(deng)方面(mian),進(jin)展十分迅(xun)速(su),想(xiang)了(le)解更多(duo)信(xin)息(xi)請致(zhi)電上(shang)海(hai)恪(ke)瑞(rui)儀(yi)器(qi)科(ke)技(ji)有(you)限公(gong)司(si),公司(si)全體(ti)員工(gong)將竭誠(cheng)為(wei)您(nin)服務! | |
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